sulla fluorescenza romanzo per rilevare siti ABASIC di acidi,Giacca Belstaff

SCOPO: Per testare la capacità di un nuovo reagente fluorescente per etichettare siti ABASIC in DNA e di utilizzare il trasferimento di energia fluorescente come misura di siti ABASIC ravvicinati in DNA.MATERIALS E METODI: Un derivato idrossilammina fluoresceina coniugato (FARP, 5- (((2- (carbohydrazino) metil) tio) acetil) aminofluorescein, aminooxyacetyl idrazide), che reagisce in modo covalente con aldeidi a catena aperta nel DNA è stato sintetizzato. Su Depurinazione di plasmide DNA e reazione con FARP un legame ossima stabile si forma tra FARP ei aldehydes.RESULTS catena aperta generati: Con quantificazione autonomamente i siti ABASIC generati, è dimostrato che la maggior parte dei siti ABASIC ottenuti in condizioni acide diventare fluorescente . Il limite di sensibilità con il fluorimetro utilizzata è di circa 90 siti ABASIC femtomole, corrispondente ad 1 sito AOperazioni principali per 17000 paia di basi. Il DNA può essere fluorescente su una vasta gamma di FARP: rapporti di coppie di basi seguenti diversa entità dei Depurinazione e carichi fluorescenti di 1 FARP: 20000 coppie di basi Nike Free Run 3 fino a 1 FARP: 10 paia di basi sono dimostrati. I campioni fortemente marcati visualizzare significativo quenching di fluorescenza a causa della vicinanza dei siti ABASIC etichettati con FARP, che sono sottoposti a trasferimento di energia di fluorescenza. Trattamento dei campioni di DNA pesantemente marcati con risultati nucleasi P1 in un aumento della fluorescenza dovuta al rilascio delle etichette fluorescenti nella soluzione. Il relativo aumento di fluorescenza è una misura quantitativa della prossimità di siti ABASIC etichettati. Inoltre si evidenzia che se solo 1% di DNA contiene siti ABASIC generati in prossimità (entro 10-20 coppie di basi o meno di ogni altro) quenching risultante Louis Vuitton Neverfull è Timberland Uomo abbastanza significativo da rilevare, anche se il resto del DNA contiene isolata AOperazioni principali sites.CONCLUSIONS: L'attuale approccio costituisce un metodo basato sulla fluorescenza romanzo per rilevare siti ABASIC di acidi nucleici e dimostra la fattibilità di rilevare la presenza di siti danni ravvicinati in DNA tramite trasferimento di energia di Giacca Belstaff fluorescenza. La tecnica comprende anche un metodo generale e conveniente per etichettare fluorescente acidi nucleici senza introdurre rotture dei filamenti a causa della procedura di etichettatura.